Большая популяция клеток врожденного и адаптивного иммунитета. Некоторые клетки (цитокинпродуцирующие NK-клетки, миелоидные супрес-сорные клетки) описаны нами выше. Некоторые клетки в практике идентифи-цировать практически невозможно. Основной популяцией регулирующих большинство этапов иммунного ответа являются Т-хелперы и Т-регуляторные лимфоциты.
Т-хелперы. CD4 представлен на поверхности отдельной субпопуляци-ей Т-лимфоцитов, получивших название Т-хелперов и обладающих феноти-пом CD3+CD4+, то есть клетками, экспрессирующими эти две молекулы од-новременно. В ходе развития Т-лимфоцитов CD4 обнаруживается в тимусе, начиная со стадии DP, после чего сохраняется на Т-хелперах до терминаль-ных стадий дифференцировки. CD4 обнаружен на мембране моноцитов, макрофагов и некоторых популяций дендритных клеток. Именно поэтому для корректного выделения Т-хелперных клеток в рамках проведения имму-нофенотипирования необходимо оценивать ко-экспрессию CD3 и CD4, чтобы избежать контаминации данной популяции Т-лимфоцитов другими клетками периферической крови. Клинические нормативы числа Т-хелперов представ-лены в таблице.
Показатели числа Т-хелперов
Возраст | Показатель | |
CD3+CD4+, % | CD3+CD4+, абс. | |
1 — 3 мес. | 41 – 64 | 1460 – 5116 |
4 — 12 мес. | 36 – 61 | 1690 – 4600 |
12 — 24 мес. | 31 — 54 | 1020 — 3600 |
2 — 5 лет. | 35 — 51 | 900 — 2860 |
Старше 6 лет. | 33 – 52 | 700 – 1100 |
Определению содержания CD4+ Т-клеток отводится ре-шающая роль при прогнозе те-чения ВИЧ-инфекции и эффективности проведения анти-ретровирусной терапии. Кроме того, изменения уровня Т-хелперов значимо при выявлении врожденных и приобретен-ных иммунодефицитных состояниях, связанных с нарушениями реакций клеточного иммунитета и дефектами продукции анти-тел при специфическом гуморальном ответе, опосредованном В-лимфоцитами. Так, увеличение абсолютного и относительного содержания CD3+CD4+ периферической крови тесно связано с наличием аутоиммунных заболеваний, может иметь место при некоторых типах аллергических реак-циях и инфекционных процессах. Снижение в свою очередь абсолютного и относительного уровня Т-хелперов в циркуляции указывает на «гипореак-тивный» синдром с нарушением регуляторного звена иммунитета, а также встречается при различных хронических заболеваниях (бронхитах, пневмо-ниях и т.д.), опухолевом росте (в первую очередь при солидных опухолях различной локализации).
По наличию на Т-хелперах различных рецепторов хемокинов можно определить их субпопуляцию. Более подробно популяции этих клеток мы описывали выше (см.выше). Сопоставляя клинические проявления с нормативными показателями различных популяций клеток, возможно оце-нить течение инфекций.
Основные популяции Т-хелперов (% от CD3+CD4+ клеток)
Популяция | Маркеры, фенотип | Показатель у здорового человека |
Th0 | CXCR5-CXCR3-CCR6-CCR4- | 34 – 49 |
Th1 | CXCR5-CXCR3+CCR6-CCR4+ | 10 – 15 |
Th2 | CXCR5-CXCR3-CCR6-CCR4+ | 4 – 7 |
Общий пул Th17: | CXCR5-CCR6+ | 19 – 29 |
— классические Th17 | CXCR5-CXCR3-CCR6+CCR4+ | 6 – 9 |
— DN Th17 | CXCR5-CXCR3-CCR6+CCR4- | 1 – 2 |
— DP Th17 | CXCR5-CXCR3+CCR6+CCR4+ | 4 – 7 |
— Th17.1 | CXCR5-CXCR3+CCR6+CCR4- | 6 – 10 |
Общий пул Tfh: | CXCR5+ | 7 – 12 |
— Tfh1 | CXCR5+CXCR3+CCR6- | 2 – 4 |
— Tfh2 | CXCR5+CXCR3-CCR6- | 1 – 3 |
— Tfh17 | CXCR5+CXCR3-CCR6+ | 2 – 4 |
— DP Tfh | CXCR5+CXCR3+CCR6+ | 1 – 2 |
Большое значение принадлежит определению стадии дифференцировки Т-хелперов.
Основные показатели стадии дифференцировки Т-хелперов
Популяция | Маркеры | Показатель у здорового человека | |
|
| % | абс |
Общее количество Th | CD3+CD4+CD8- | 44–53 | 670–1050 |
Наивные Th | CD3+CD4+CD45RA+CD62L+ | 12–19 | 190–325 |
Th центральной памяти | CD3+CD4+CD45RA-CD62L+ | 16–23 | 260–470 |
Th эффекторной памяти | CD3+CD4+CD45RA-CD62L- | 9–13 | 130–240 |
Терминально дифференцированные Th | CD3+CD4+CD45RA+CD62L- | 1–2 | 3–15 |
Не потерял свое значение анализ соотношения CD4/CD8. Соотноше-ние субпопуляций Т-хелперов и цитотоксических Т-клеток (также известное под устаревшим названием «иммунорегуляторный» индекс) является расчет-ным показателем, получаемым в результате деления величины относительно-го (или абсолютного) содержания CD3+CD4+ клеток на аналогичное значе-ние CD3+CD8+ клеток (рис. 68). В норме это значение находится в пределах 1,5–2,6, тогда как при ряде патологических состояний, связанных с наруше-ниями в функционировании клеточных механизмов приобретенного иммуни-тета, эта величина существенно изменяется. Классическим примером является сниженное соотношение CD4/CD8 при ВИЧ-инфекции.
Анализ соотношения CD4/CD8 в норме (гистограмма слева) и
при ВИЧ-инфекции (гистограмма справа)
Анализ образцов периферической крови проведен на проточном цитометре Navios 3/10 (Beckman Coulter Inc., USA), полученные результаты обработаны при помощи Kaluza Software 2.1 (Beckman Coulter Inc., USA)
На гистограммах приведены результаты анализа распределения клеток по экспрессии CD4 (ось абсцисс) и CD8 (ось ординат) в рамках популяции Т-лимфоцитов. У условно здорового донора CD4/CD8 составляет 2,09 (62,17/29,68=2,09), тогда как у пациента с ВИЧ инфекцией – 0,55 (31,87/58,29=0,55). В целом, устойчиво низкое соот-ношение CD4/CD8 в течение длительного применения антиретровирусной терапии является маркером нарушений в функционировании иммунной си-стемы, наличия хронического воспалительного процесса, а также высокого риска заболеваемости сопутствующими» инфекциями и, как следствие, по-вышенной вероятности летального исхода.
Однако, снижение соотношения CD4/CD8 наблюдается и при врожден-ных иммунодефицитах (синдром Ди-Джоржи, Незелофа, Вискотта-Олдрича), при других вирусных и бактериальных инфекциях, хронических процессах, воздействии радиации и токсических химических веществ, множественной миеломе, стрессе, при эндокринных заболеваниях, солидных опухолях, а также снижается с возрастом. Увеличение соотношения CD4/CD8 более трех – отмечается при широком круге аутоиммунных заболеваний, остром Т-лимфобластном лейкозе, тимоме, хроническом Т-клеточном лейкозе.
